Экспресс-тест на аденовирус - выделения из носа

Предполагаемое использование:

Набор для тестирования нуклеиновых кислот на SARS-CoV-2 применяется для качественного обнаружения нуклеиновой кислоты COVID-19 в мазках из носоглотки, ротоглотки и мокроте. Результаты теста обеспечивают основу для молекулярной диагностики инфекции или пациентов с подозрением на нее и не должны использоваться в качестве единственного критерия для клинического диагноза.

Материалы:

Тестовая процедура:

А. Подготовка проб

Экстрагированная РНК является исходным материалом для набора для тестирования нуклеиновых кислот SARS-CoV-2.

Важно: Каждая процедура выделения нуклеиновой кислоты должна выполняться одновременно с одним положительным контролем (40 мкл, развести стерильными солевыми растворами/PBS до нужного объема) и одним отрицательным контролем (40 мкл, развести стерильными солевыми растворами/PBS до нужного объема).

Рекомендуется использовать следующие коммерческие наборы для выделения нуклеиновых кислот: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Мини-набор вирусной РНК (QIAGEN); набор TIANamp Hi-DNA/RNA (TIANGEN);

B. Настройка реакционной смеси

1. Все реагенты и образцы должны быть полностью разморожены, полностью перемешаны и кратковременно центрифугированы при комнатной температуре (приблизительный диапазон от 18 до 25 градусов) перед использованием.

2. Приготовьте необходимый объем реакционной смеси в полипропиленовой микроцентрифужной пробирке подходящего размера.

3. Внесите пипеткой по 25 мкл реакционной смеси в каждую требуемую лунку соответствующего оптического 96-луночного реакционного планшета или соответствующей оптической реакционной пробирки.

C. Добавление шаблона

1. Добавьте 5 мкл выделенной РНК из Образцов/Положительного контроля/Отрицательного контроля. Общий объем составляет 30 мкл.

2. Тщательно перемешайте образцы и контроли с реакционной смесью, пипетируя вверх и вниз/вортекс.

3. Закройте 96-луночный реакционный планшет соответствующими крышками или оптической клейкой пленкой, а реакционные пробирки - соответствующими крышками.

4. Отцентрифугируйте 96-луночный реакционный планшет в центрифуге с ротором для микротитровальных планшетов в течение 30 секунд при приблизительно 2500 об/мин.

D. Программирование прибора ПЦР в реальном времени

Для получения основной информации о настройке и программировании различных инструментов ПЦР в реальном времени см. руководство пользователя соответствующего прибора. Анализ был оптимизирован для системы ПЦР в реальном времени ABI7500. Прогон ПЦР выполняется с условиями циклирования, как описано в таблице ниже.

Определение флуоресцентных детекторов

*Пожалуйста, установите для внутреннего эталона флуоресценции прибора значение «Нет», например: Для приборов серии ABI установите «Пассивный эталон» на «Нет».

Е. Анализ данных

Пожалуйста, установите параметры анализа и проанализируйте данные в соответствии с инструкциями по эксплуатации соответствующих инструментов.

Возьмите ABI 7500 в качестве примера:

Базовый уровень должен быть установлен в диапазоне, который устраняет фоновую флуоресценцию, обнаруживаемую в ранних циклах амплификации, но не перекрывает область, в которой сигналы амплификации поднимаются над фоном (начальное значение: 3~10; конечное значение: {{2}). }). Порог цикла (Ct) должен находиться в основании экспоненциальной фазы. Нажмите «Анализ», чтобы автоматически получить результат анализа, и прочитайте результат обнаружения в окне «Отчет».

горячая этикетка : Экспресс-тест на аденовирус - секрет из носа, Китай, поставщики, производители, фабрика, оптом